Наборы клонирования pENTR ™ / D-TOPO® используют высокоэффективную стратегию клонирования 5 минут («клонирование TOPO®») для направленного клонирования продукта ПЦР тупого конца в вектор для входа в систему Gateway® или MultiSite Gateway ®. Продукт ПЦР с тупым концом направлен с направлением в сторону более 90% эффективности без применения лигазы, пост-ПЦР-процедур или рестрикционных ферментов. _x000D_ _x000D_ Комплект поставляется со всем необходимым для клонирования и выбора вашего усиленного гена PCR:_x000D_ _x000D_ • Gateway® System Ready - быстро перемещает клонированные гены между несколькими векторными системами. _x000D_ • Быстро и легко перейти от PCR к Gateway® Entry clone всего за 3 шага и как немного, как ~ 5 минут вовремя _x000D_ • Эффективно-Достичь более 90% клонов с правильной вставкой в ​​правильном направлении. _x000D_ • Проверенная надежность. Более десяти лет_x000D_ _x000D_ Комплекты для клонирования pENTR ™ / D-TOPO® Обзор_x000D_ _x000D_ _x000D_ _x000D_ _x000D_ ВЕКТОР_x000D_ _x000D_ _x000D_ вектор pENTR ™ / D-TOPO®_x000D_ _x000D_ _x000D_ Направленный вектор клонирования для входа в систему шлюза_x000D_ _x000D_ _x000D_ _x000D_ _x000D_ МЕТОД КОДИРОВАНИЯ_x000D_ _x000D_ _x000D_ Направленное клонирование TOPO®_x000D_ _x000D_ _x000D_ Топоизомераза I на основе 5-минутного направленного лигирования продуктов ПЦР с субстратной коррекцией с полимеразной амплификацией к вектору_x000D_ _x000D_ _x000D_ _x000D_ _x000D_ КОМПЕТЕНТНЫЕ КЛЕТКИ_x000D_ _x000D_ _x000D_ Два варианта_x000D_ _x000D_ _x000D_ Выбирайте из комплектов с высокой эффективностью или быстро растущими компетентными ячейками_x000D_ _x000D_ _x000D_ _x000D_ _x000D_ _x000D_ Простой доступ к системе Gateway®_x000D_ Для доступа к системе Gateway® просто PCR усиливает ваш ген, представляющий интерес, и добавляет продукт прямо к предоставленному топоизомеразе, заряженному вектору pENTR ™ / D-TOPO®, инкубирует 5 минут и преобразует предоставленные компетентные E. coli . Полученные attL-содержащие квоты Gateway® Entry готовы для эффективной рекомбинации с вашим выбором векторов Gateway® Destination. _x000D_ _x000D_ Оптимизированный вектор pENTR ™ / D-TOPO® Vector_x000D_ Вектор pENTR ™ / D-TOPO® (фиг. 1) включает сайты секвенирования праймеров M13 и T7 и сайты рекомбинации attL, фланкирующие сайт для введения продукта PCR. Это позволяет легко проверять последовательности и рекомбинировать клоны в ваш выбор attR, содержащий векторы назначения Gateway®. Ген для резистентности к канамицину и источник pUC используются для селекции и высокоскоростного распространения в E.coli . _x000D_ _x000D_ Упрощенное наклонное клонирование_x000D_ С технологией клонирования Nirectional TOPO® нет необходимости в очистке ПЦР, подготовке вектора или других временных манипуляциях по обработке ДНК. Просто добавьте свою реакцию ПЦР прямо к предоставленному вектору, покрытому топоизомеразой, инкубируйте 5 минут, трансформируйте и получите до 90% направленных внутрь клонов. Четыре основных свеса на векторных парах с четырьмя базовыми последовательностями, сконструированными в прямом праймере, используемом в вашей реакции ПЦР, для обеспечения направленности реакции лигирования топоизомеразы (рисунок 2). _x000D_ _x000D_ Технология клонирования технологии Gateway® для рекомбинации_x000D_ Технология клонирования методом Gateway® обходит ограничения ограниченного ограничением клонирования, позволяя вам получить доступ к практически любой системе экспрессии в течение простого часа, 99% -эффективной и обратимой реакции рекомбинации Gateway®. Способность перемещать одну и ту же последовательность ДНК между различными векторами без использования рестрикционных ферментов, лигазы, этапов субклонирования, скрининга бесчисленных колоний или повторного секвенирования поможет сэкономить вам время, деньги и усилия. _x000D_ _x000D_ Ведущие технологии клонирования_x000D_ Когда дело доходит до клонирования, технология клонирования TOPO® и технология клонирования рекомбинации Gateway® были надежным партнером для тысяч ученых уже более десяти лет. Быстрое, простое в использовании и эффективное клонирование TOPO® и рекомбинация Gateway® позволяют быстро клонировать и последующей передачи генов между широким спектром векторов экспрессии Gateway®. _x000D_ _x000D_ Варианты комплектации_x000D_ Набор для клонирования pENTR ™ / D-TOPO® можно приобрести либо с помощью компетентных клеток TOP10 для стандартного клонирования, либо для компетентных клеток Mach1 ™ -T1R для быстрого роста. _x000D_ _x000D_ Только для исследования. Не предназначен для использования в терапевтических или диагностических целях для животных или человека.

Фрагмент Thermo Scientific Klenow является крупным фрагментом ДНК-полимеразы I. Он проявляет 5 '→ 3' полимеразную активность и 3 '→ 5' экзонуклеазную (корректирующую) активность, но не обладает 5 '→ 3' экзонуклеазной активностью ДНК-полимеразы I. _x000D_ _x000D_ Основные моменты_x000D_ _x000D_ • Включает в себя модифицированные нуклеотиды (например, Cy3-, Cy5-, аминоаллил-, биотин-, дигоксигенин- и флуоресцентно-меченные нуклеотиды). _x000D_ • Активен в рестрикционных ферментных, ПЦР, ОТ и T4 ДНК-лигазных буферах.