Идет поиск...

Новости

Аффинная хроматография от Welch

Аффинная хроматография - это метод разделения биомолекул, основанный на характеристиках специфического распознавания и обратимого связывания между биомолекулами и некоторыми соответствующими специфическими веществами. Аффинная хроматография является очень эффективным методом разделения белков, который обычно занимает один этап для получения белков высокой чистоты. Белки разделяются в соответствии с их специфичностью к конкретным лигандам, а не с их способностью к ковалентному связыванию.

  • Отличная эффективность, быстрота и удобство;
  • Хорошая селективность;
  • Обычно требуется один шаг для получения белков высокой чистоты;
  • Высокая скорость восстановления.


Аффинные сорбенты с белком А предназначены для аффинной очистки иммуноглобулинов класса IgG, Fc-фрагментов, поликлональных и моноклональных антител млекопитающих; для удаления иммуноглобулинов класса IgG из биологических жидкостей; для количественной оценки содержания поли- и моноклональных антител в иммунных сыворотках, асцитных и культуральных жидкостях.

Сорбенты Protein A образуются за счет того, что лиганд рекомбинантного белка А соединяется с агарозным гелем посредством тиоэфирной связи.

Технические параметры:

 Параметры

Protein A Tanrose 4FF

Solid Protein A

Структура гранул

4% сильно поперечно-сшитая агароза

Высокотвердая агароза

Фракционный состав гранул

45-165 мкм

45-120 мкм

Средний размер частиц

90 мкм

75 мкм

Связывающая способность

>20 мг (IgG человека)/мл (среда)

>28 мг (IgG человека)/мл (среда)

Стабильность рН

3-9 (долгосрочная), 2-11 (краткосрочная)

3-10 (долгосрочная), 2-12 (краткосрочная)

Химическая стабильность

8 М мочевина, 20% этанол, 6 М гидрохлорид гуанидина (8 дней), стабилен при рН 2-9.

Макс. Скорость потока

250 см/ч

500 см/ч

Рабочее давление

≤0,3 МПа

≤0,5 МПа

Растворитель для хранения

20% этанол

Температура хранения

4-8℃

Информация для заказа:

Продукт P/N Спецификация
Protein A Tanrose 4FF AF4020 5 мл
AF4021 25 мл
AF4022 200 мл
AF4023 1 л

 

Рекомбинантный белок А, устойчивый к щелочами выделяется путем экспрессии E.coli, и последующей хроматографической очисткой. Очистка антител путём аффинной хроматографии не используется в процедуре очистки лиганда, что позволяет избежать возможности попадания нерелевантных IgG в продукт. При обработке растворами 0,5 М NaOH и 0,5 М HCl лиганд не разрушается, и способность связывания антител остается неизменной.

Эта среда подходит для удерживания моноклональных антител или рекомбинантных белков Fc из больших партий культурального раствора, а также подходит для удерживания поликлональных антител из асцита или плазмы.

Технические параметры:

Параметры

Alkali resistant Protein A Tanrose 4FF

Alkali resistant Protein A Solid

Структура гранул

4% сильно поперечно-сшитая агароза

Высокотвердая агароза

Фракционный состав гранул

45-165 мкм

45-120 мкм

Средний размер частиц

90 мкм

75 мкм

Связывающая способность

>20 мг (IgG человека)/мл (среда)

>40 мг (IgG человека)/мл (среда)

Стабильность рН

3-12 (долгосрочная), 2-13 (краткосрочная)

Химическая стабильность

8М мочевина, 20% этанол, 6М гидрохлорид гуанидина (8 дней), 0,5М NaOH, стабилен при pH 2-9

Макс. скорость потока

250 см/ч

500 см/ч

Рабочее давление

≤0.3 МПа

≤0.5 МПа

Растворитель для хранения

20% этанол

Температура хранения

4-8℃

 

Применение
Колонка: PreCot 5ml rProtein A Solid
Тип среды: Щелочестойкий Твердый Белок A Буфер: PBS
Элюент 1: pH 4
Элюент 2: pH 3.5
Образец: Раствор рекомбинантных моноклональных антител для клеточной культуры

Информация для заказа:

Продукт P/N Спецификация Продукт P/N Спецификация
Alkali resistant Protein A Tanrose 4FF AF4050 10 мл Alkali resistant Protein A Solid AF4080 10 мл
AF4051 25 мл AF4081 25 мл
AF4052 100 мл AF4082 100 мл
AF4053 500 мл AF4083 500 мл
AF4054 1 л AF4084 1 л

В металл-хелатной аффинной хроматографии используется свойство белков связываться с иммобилизованными ионами металлов, таких как Сu2+ , Zn2+ , Ni2+, Co2+ , Fe2+. Специфическое связывание осуществляется за счет наличия на поверхности белка свободных электронодонорных групп. В условиях МХАХ (нейтральные значения pH и высокие концентрации соли) в качестве потенциальных лигандов в белке могут выступать имидазольная группа гистидина, тиольная группа цистеина и индольная группа триптофана.Наиболее широко распространены следующие хелатирующие группы: iminodiacetate (IDA), nitrilotriacetic acid (NTA) carboxymethylaspartate (CM-Asp), Tris(carboxymethyl) ethylendiamin (TED), Трис(карбоксиметил)амин (Нитрилтриуксусная кислота, NTA) в комплексе с Ni2+ образует очень стабильную октаэдрическую структуру. Он имеет хорошие адсорбционные характеристики и высокую селективность, обладает способностью к легкой регенерации и низкой стоимостью. Он широко используется для разделения и очистки белков и пептидов в биофармацевтике и биоинженерии, особенно для эффективной очистки белков с гистидиновой меткой.

Аффинная среда Ni Tanrose 6FF (IDA) образуется путем хелатирования иона металла Ni2+ на агарозном геле с иминодиуксусной кислотой (IDA) в качестве лиганда.

Из-за небольшого количества связей между ионами никеля и лигандами, Ni2+ уязвим для атаки малых молекул и склонен отсоединятся.

Технические параметры:

 Параметры

Ni Tanrose 6FF(NTA)

Ni Tanrose 6FF(IDA)

Структура гранул

6% сильно поперечно-сшитая агароза

Фракционный состав гранул

45-165 мкм

Средний размер частиц

90 мкм

Связывающая способность

40 мг (His-меченый белок) / мл (среда)

45 мг (His-меченый белок) / мл (среда)

Стабильность рН

3-12 (долгосрочная), 2-14 (краткосрочная)

3-12 (долгосрочная), 2-14 (краткосрочная)

Химическая стабильность

0,01 M HCl, 0,01 M NaOH (одна неделя), 1 M натрия гидроксид,

70% EtOH (12 часов), 2% SDS (1 час), 30% IPA (0,5 часа)

Все распространенные водные растворы и буферы.
Избегайте использования хелатирующих агентов (таких как ЭДТК, ЭГТК)
и восстановителей (таких как ДТТ и DTE)

Скорость потока

600 см/ч

Рабочее давление

≤0,3 МПа

Растворитель для хранения

20% этанол

 

Применение  
Колонка: PreCot 1 мл Ni 6FF (NTA)
Буфер A: 20 mM PB, 0.5 M NaCl, 20 mM имидазол, pH 7.6
Буфер B: 20 mM PB, 0.5 M NaCl, 0.5 M имидазол, pH 7.6
Образец: E. coli экспрессирует с супернатантом лизата меченного гистидином рекомбинантного белка

Информация для заказа:

Продукт P/N Спецификация Продукт P/N Спецификация
Ni Tanrose 6FF(NTA) AF6001 25 мл Ni Tanrose 6FF (IDA) AID001 25 мл
AF6002 100 мл AID002 100 мл
AF6003 500 мл AID003 500 мл
AF6004 1 л AID004 1 л

 

Металл-хелатная аффинная среда IMAC Tanrose 6FF/Chelating Tanrose 6FF.

Гистидиновая метка чаще всего используется для рекомбинантных белков. Препаративная очистка рекомбинантных белков, меченных гистидином на иммобилизованных металл-аффинных сорбентах (IMAC) является самым популярным и эффективным методом выделения.

IMAC использует способность гистидина связываться с хелатным ио-ном переходного металла, таким, как никель(Ni2+). Очистка белков, меченных гистидином, может проводиться как в нативных, так и в денатурирующих условиях

Среда IMAC Tanrose 6FF/Chelating Tanrose 6FF состоит из 6% сверхсшитых агарозных гранул, модифицированных новым хелатирующим лигандом, иммобилизованом на основной матрице.

Эти среды поставляются свободными от металл-ионов, так же как Ni Tanrose 6FF (NTA) и Ni Tanrose 6FF (IDA), которые не хелатируются с ионами Ni. Принцип заключается в использовании боковых цепей гистидина, цистеина и триптофана белков, которые взаимодействуют с различными ионами переходных металлов Их можно широко использовать при разделении и очистке белков и пептидов.

IMAC Tanrose 6FF образуется путем соединения аминотриуксусной кислоты (NTA) с агарозой. Она может хелатировать четырехвалентные ионы металлов, что делает их более стабильными и выдерживающими более сильные восстановители с хорошей физической и химической стабильностью, благодаря чему имеет большую специфичность может применяться на более высоких скоростях потока.

Chelating Tanrose 6FF образуется путем связывания иминодиуксусной кислоты (IDA) с агарозой. Лиганды Chelating Tanrose 6FF могут обеспечивать 3 координационных центра для хелатирования с ионами металлов и одновременно обеспечивать три центра ионной связи с высокой аффинностью для очистки целевого белка. Среда IMAC Tanrose 6FF может обеспечить четыре координационных центра для хелатирования с ионами металлов и два центра ионных связей для очистки целевого белка, что означает, что среда Chelating Tanrose 6FF обладает более сильным сродством, чем IMAC Tanrose 6FF, при той же плотности лиганда и условиях с ионами металлов. Все образцы, которые нельзя адсорбировать в среде IMAC Tanrose 6FF, можно выбрать для связывания с Chelating Tanrose 6FF.

Технические параметры:

Параметры

IMAC Tanrose 6FF

Chelating Tanrose 6FF

Структура гранул

6% сильно поперечно-сшитая агароза

Фракционный состав гранул

45-165 мкм

Средний размер частиц

90 мкм

Связывающая способность

25 мкмоль Cu2+ /мл (среда)

15 мкмоль Ni2+ /Zn2+ мл (среда)

34 мкмоль Cu2+ /мл (среда)

Стабильность pH

3-12 (долгосрочная), 2-14 (краткосрочная)

3-13 (долгосрочная), 2-14 (краткосрочная)

Химическая стабильность

0,01 М HCl, 0,1 М NaOH, 8 М мочевины, 6 М гидрохлорида гуанидина (одна неделя)

Стабилен в обычных водных растворах, 1 М NaOH, 8 М мочевины, 6 М гидрохлорида гуанидина.

Скорость потока

600 см/ч

Рабочее давление

≤0,3 МПа

Избегать использования

ЭДТК, ЭГТК, цитрат, гистидин

ЭДТК, ЭГТК, цитрат, гистидин, β- меркаптоэтанол, ДТТ

Растворитель для хранения и температура

20% этанол, 4-30℃

20% этанол, 4-30℃

Информация для заказа:

Продукт P/N Спецификация Продукт P/N Спецификация
IMAC Tanrose 6FF AI0001 25 мл Chelating Tanrose 6FF AC0001 25 мл
AI0002 100 мл AC0002 100 мл
AI0003 500 мл AC0003 500 мл
AI0004 1 л AC0004 1 л


Benzamidine Tanrose 4FF представляет собой среду для аффинной хроматографии, образованную сочетанием p-аминобензидина с агарозным гелем Tanrose 4FF. Benzamidine Tanrose 4FF обычно используется для выделения и очистки сериновой протеазы или удаления сериновой протеазы из биологических образцов. Бензамидин является ингибитором сериновых протеаз широкого спектра действия (таких как трипсин, тромбин, урокиназа, калликреин, прокинин и др.), поэтому эта среда может очищать такие вещества.

Технические характеристики:

Параметры

Benzamidine Tanrose 4FF

Структура гранул

4% сильно поперечно-сшитая агароза

Фракционный состав гранул

45-165 мкм

Средний размер частиц

90 мкм

Лиганд

P-аминофенамидин

Связывающая способность

35 мг (трипсин)/ мл (среда)

Стабильность pH

1-9 (краткосрочная), 2-8 (долгосрочная)

Химическая стабильность

Все обычно используемые буферные растворы, 8 М мочевина, 6 М гидрохлорид гуанидина

Скорость потока

300 см/ч

Рабочее давление

≤0,3 МПа

Растворитель для хранения

0,05 М ацетатный буфер, 20% этанол, рН 4,0

Температура хранения

4-8℃

 

Применение  
Колонка: PreCot 5ml Бензамидин Tanrose 4FF Образец: смесь трипсина
Буфер для связывания: 50 mM PB, 50 mM NaCl pH 7,0
Элюирующий буфер: 0,1 M GIy pH 2.7
(200 мкл 1 M Трис-HCl, pH 9,0 следует заранее добавить в пробирку для сбора элюента)
Скорость потока: 0,7 мл/мин

Информация для заказа:

Продукт P/N Спецификация
Benzamidine Tanrose 4FF AF4060 25 мл
AF4061 100 мл
AF4062 500 мл
AF4063 1 л

 

GST Tanrose 4FF Glutathione.

Среда GST Tanrose 4FF образуется путем связывания глутатиона с агарозой. Он специально используется для специфической очистки глутатиона S-трансферазы (GST) и фьюжн белков GST. Метка GST является широко используемой меткой в современной генной инженерии для экспрессии фьюжн белков, что способствует экспрессии растворимых форм и поддержанию активности белков. Принцип очистки заключается в слиянии и экспрессии глутатионтрансферазы с целевым белком. Белок объединенный с меткой GST очищается посредством взаимодействия глутатионтрансферазы и глутатионового лиганда.

Технические характеристики:

Параметры

GST Tanrose 4FF

Структура гранул

4% сильно поперечно-сшитая агароза

Диапазон размеров гранул

45-165 мкм

Средний размер частиц

90 мкм

Связывающая способность

10 мг (Белок-метка GST) /мл (среда)

Стабильность pH

3-12

Химическая стабильность

Все обычно используемые водные растворы, такие как 1М ацетат, pH 4,0, 0,1М NaOH, 70% этанол, 8М мочевина, 6М гидрохлорид гуанидина (комнатная температура, 1 час)

Скорость потока

450 см/ч

Рабочее давление

≤0,3 МПа

Растворитель для хранения

20% этанол

Температура хранения

4-30℃

 

Применение
Колонка: PreCot 5мл GST 4FF
Образец: рекомбинантная экспрессия белка-метки GST
Буфер для связывания: 20 mM PB, 150 mM NaCl pH 7,4
Элюирующий буфер: 15 мМ восстановленный глутатион 50 мМ Трис pH 8,0


Информация для заказа:

Продукт P/N Спецификация
GST Tanrose 4FF AF4010 25 мл
AF4011 100 мл
AF4012 500 мл
AF4013 1 л

Аффинный сорбент Heparin Tanrose 6FF

Heparin Tanrose 6FF состоит из 6% сильно поперечно-сшитой агарозы, которая

использует гепарин в качестве лиганда. Гепарин является сильно сульфатированным гликозамином, способным связывать широкий диапазон биомолекул. ДНК-связывающие белки, такие как факторы инициации, факторы элонгации, рестриктазы, ДНК-лигазы, ДНК- и РНКполимеразы, ингибиторы сериновых протеаз, такие как антитромбин III и т.д.

Гепарин может связываться с антикоагулянтным фактором III, тромбином, тромбиноподобными факторами свертывания крови человека IX, XI и VIII. Кроме того, гепарин также может связываться с интерлейкином человека и фактором роста предстательной железы человека, рекомбинантным фактором роста эндотелия сосудов человека, фактором роста хрящей, основным фактором роста фибробластов, рекомбинантным кислотным фактором роста фибробластов человека, рекомбинантным фактором роста гепатоцитов, рекомбинантным мышиным кофактором гепарина II, рекомбинантным четвертым фактором тромбоцитов человека, рекомбинантным эндостатином человека, рекомбинантным фактором роста кератиноцитов человека и другими биологическими макромолекулами, которые экспрессируются E. coli, поэтому для очистки таких веществ можно использовать гепарин-агарозный гель.

Технические характеристики:

Параметры

Heparin Tanrose 6FF

Структура гранул

6% сильно поперечно-сшитая агароза

Диапазон размеров гранул

45-165 мкм, 90 мкм

Функциональная группа

Гепарин натрия

Плотность лиганда

4 мг/мл (среда)

Стабильность pH

3-12

Химическая стабильность

Все распространенные водные растворы, такие как: 50 мМ ацетат (рН 4,0), 0,1 М NaOH (20 ℃, одна неделя), 70% этанол, 8 М мочевина, 6 М гуанидин гидрохлорид.

Скорость потока

600 см/ч

Рабочее давление

≤0,3 МПа

Растворитель для хранения

0,05 M NaAc, 20% этанол

Температура хранения

4-30℃

Информация для заказа:

Продукт P/N Спецификация
Heparin Tanrose 6FF AF4070 25 мл
AF4071 100 мл
AF4072 500 мл
AF4073 1 л

 

Аффинный сорбент Endotoxin rem Tanrose 4FF

Матрица сорбента Endotoxin rem Tanrose 4FF состоит 4% сильно поперечно-сшитого агарозного геля и полимиксин B в качестве лиганда. Его можно использовать для удаления эндотоксинов из биогенных белковых продуктов, таких как пептиды, антитела, полисахариды и т. д. Этот продукт обладает хорошей химической и физической стабильностью и хорошей биосовместимостью.

 

Параметры

Endotoxin rem Tanrose 4FF

Структура гранул

4% сильно поперечно-сшитый агарозный гель

Лиганд

Полибактерин В

Форма

Сферический

Средний размер частиц

90 мкм, (45-165 мкм)

Плотность лиганда

5 мг/мл (среда)

Связывающая способность

5,000-10,000 EU / мл среда

Макс. скорость потока

300 см/ч

Идеальная скорость потока (25℃)

100 см/ч

Макс. рабочее давление

0,3 МПа (3 бар)

Стабильность pH

3-10 (долгосрочная), 2-13 (краткосрочная)

Химическая стабильность

30% изопропанол, 8 М мочевина, 6 М гидрохлорид гуанидина

Условия хранения

4-8℃, 20% этанол

Информация для заказа:

Продукт P/N Спецификация
Endotoxin rem Tanrose 4FF AE4010 10 мл
AE4011 25 мл
AE4012 100 мл
AE4013 500 мл



Предварительно активированная аффинная среда Tanrose 4FF, активированная NHS.

NHS Tanrose 4FF — это предварительно активированный быстротекучий агарозный гель.

  • Легко образует амидные связи с белками, обладает высокой химической стабильностью.;
  • Гибкое связывание лиганда, значительно улучшающее специфичность очистки.;
  • Выдвижная ручка с 10 атомами углерода для уменьшения стерических несоответствий на поверхности агарозы.;
  • Простое управление, избегайте использования высокотоксичного сырья.

Технические параметры:

Параметры

NHS Tanrose 4FF

Структура гранул

4% сильно поперечно-сшитая агароза

Активированная группа

N-гидроксисукцинимид

Плотность лиганда

16-23 мкмоль/мл (среда)

Связующая функциональная группа

-NH2

Средний размер частиц

90 мкм (45~165 мкм)

Макс. рабочее давление

0,3 МПа (3 бар)

Идеальная скорость потока

150 см/ч

Химическая стабильность

30% изопропанол, 8 М мочевина, 6 М гидрохлорид гуанидина.

Стабильность pH

3-13 (долгосрочная), 2-13 (краткосрочная)

Условие хранения

4~8℃ (100% изопропанол)

Информация для заказа:

Продукт P/N Спецификация
NHS Tanrose 4FF AN0010 25 мл
AN0011 100 мл
AN0012 500 мл
AN0013 1 л

 

ДРУГИЕ НОВОСТИ

2022-05-11
Спектрофотометры UV/VIS, анализаторы общего органического углерода и системы микроволнового разложения
2019-05-31
Лицензия на осуществление закупки, хранения и поставок спиртосодержащей непищевой продукции.

Уважаемые партнёры!

Благодарим Вас за сотрудничество с компанией «ХИММЕД»!

С целью повышения качества работы компании «ХИММЕД» просим оценить наши условия сотрудничества по пятибалльной шкале (где 1 – очень плохо, а 5 – отлично):

Если в указанном списке нет пунктов, на которые Вы хотели бы обратить наше внимание, просим указать их.

По возможности оставьте развернутый комментарий о качестве работы компании «ХИММЕД» и Ваши пожелания для улучшения и расширения сотрудничества.

Нам важно Ваше мнение!

АДРЕС
115230 Россия, Москва, Каширское шоссе, дом 3, корпус 2, строение 4/9
(на территории бизнес-центра "Сириус Парк"), ООО ТД “ХИММЕД”

Этот сайт использует cookie. Продолжая пользоваться сайтом, вы даёте своё согласие на работу с этими файлами.