Аффинная хроматография от Welch

Аффинная хроматография - это метод разделения биомолекул, основанный на характеристиках специфического распознавания и обратимого связывания между биомолекулами и некоторыми соответствующими специфическими веществами. Аффинная хроматография является очень эффективным методом разделения белков, который обычно занимает один этап для получения белков высокой чистоты. Белки разделяются в соответствии с их специфичностью к конкретным лигандам, а не с их способностью к ковалентному связыванию.

• Отличная эффективность, быстрота и удобство;
• Хорошая селективность;
• Обычно требуется один шаг для получения белков высокой чистоты;
• Высокая скорость восстановления.

Аффинные сорбенты с белком А предназначены для аффинной очистки иммуноглобулинов класса IgG, Fc-фрагментов, поликлональных и моноклональных антител млекопитающих; для удаления иммуноглобулинов класса IgG из биологических жидкостей; для количественной оценки содержания поли- и моноклональных антител в иммунных сыворотках, асцитных и культуральных жидкостях.

Сорбенты Protein A образуются за счет того, что лиганд рекомбинантного белка А соединяется с агарозным гелем посредством тиоэфирной связи.

Технические параметры:

Информация для заказа:

Продукт	P/N	Спецификация
Protein A Tanrose 4FF	AF4020	5 мл
	AF4021	25 мл
	AF4022	200 мл
	AF4023	1 л

Рекомбинантный белок А, устойчивый к щелочами выделяется путем экспрессии E.coli, и последующей хроматографической очисткой. Очистка антител путём аффинной хроматографии не используется в процедуре очистки лиганда, что позволяет избежать возможности попадания нерелевантных IgG в продукт. При обработке растворами 0,5 М NaOH и 0,5 М HCl лиганд не разрушается, и способность связывания антител остается неизменной.

Эта среда подходит для удерживания моноклональных антител или рекомбинантных белков Fc из больших партий культурального раствора, а также подходит для удерживания поликлональных антител из асцита или плазмы.

Технические параметры:

Применение
Колонка: PreCot 5ml rProtein A Solid Тип среды: Щелочестойкий Твердый Белок A Буфер: PBS Элюент 1: pH 4 Элюент 2: pH 3.5 Образец: Раствор рекомбинантных моноклональных антител для клеточной культуры

Информация для заказа:

Продукт	P/N	Спецификация	Продукт	P/N	Спецификация
Alkali resistant Protein A Tanrose 4FF	AF4050	10 мл	Alkali resistant Protein A Solid	AF4080	10 мл
	AF4051	25 мл		AF4081	25 мл
	AF4052	100 мл		AF4082	100 мл
	AF4053	500 мл		AF4083	500 мл
	AF4054	1 л		AF4084	1 л

В металл-хелатной аффинной хроматографии используется свойство белков связываться с иммобилизованными ионами металлов, таких как Сu²⁺ , Zn²⁺ , Ni²⁺, Co²⁺ , Fe²⁺. Специфическое связывание осуществляется за счет наличия на поверхности белка свободных электронодонорных групп. В условиях МХАХ (нейтральные значения pH и высокие концентрации соли) в качестве потенциальных лигандов в белке могут выступать имидазольная группа гистидина, тиольная группа цистеина и индольная группа триптофана.Наиболее широко распространены следующие хелатирующие группы: iminodiacetate (IDA), nitrilotriacetic acid (NTA) carboxymethylaspartate (CM-Asp), Tris(carboxymethyl) ethylendiamin (TED), Трис(карбоксиметил)амин (Нитрилтриуксусная кислота, NTA) в комплексе с Ni²⁺ образует очень стабильную октаэдрическую структуру. Он имеет хорошие адсорбционные характеристики и высокую селективность, обладает способностью к легкой регенерации и низкой стоимостью. Он широко используется для разделения и очистки белков и пептидов в биофармацевтике и биоинженерии, особенно для эффективной очистки белков с гистидиновой меткой.

Аффинная среда Ni Tanrose 6FF (IDA) образуется путем хелатирования иона металла Ni²⁺ на агарозном геле с иминодиуксусной кислотой (IDA) в качестве лиганда.

Из-за небольшого количества связей между ионами никеля и лигандами, Ni²⁺ уязвим для атаки малых молекул и склонен отсоединятся.

Технические параметры:

Применение
Колонка: PreCot 1 мл Ni 6FF (NTA) Буфер A: 20 mM PB, 0.5 M NaCl, 20 mM имидазол, pH 7.6 Буфер B: 20 mM PB, 0.5 M NaCl, 0.5 M имидазол, pH 7.6 Образец: E. coli экспрессирует с супернатантом лизата меченного гистидином рекомбинантного белка

Информация для заказа:

Продукт	P/N	Спецификация	Продукт	P/N	Спецификация
Ni Tanrose 6FF(NTA)	AF6001	25 мл	Ni Tanrose 6FF (IDA)	AID001	25 мл
	AF6002	100 мл		AID002	100 мл
	AF6003	500 мл		AID003	500 мл
	AF6004	1 л		AID004	1 л

Металл-хелатная аффинная среда IMAC Tanrose 6FF/Chelating Tanrose 6FF.

Гистидиновая метка чаще всего используется для рекомбинантных белков. Препаративная очистка рекомбинантных белков, меченных гистидином на иммобилизованных металл-аффинных сорбентах (IMAC) является самым популярным и эффективным методом выделения.

IMAC использует способность гистидина связываться с хелатным ио-ном переходного металла, таким, как никель(Ni2+). Очистка белков, меченных гистидином, может проводиться как в нативных, так и в денатурирующих условиях

Среда IMAC Tanrose 6FF/Chelating Tanrose 6FF состоит из 6% сверхсшитых агарозных гранул, модифицированных новым хелатирующим лигандом, иммобилизованом на основной матрице.

Эти среды поставляются свободными от металл-ионов, так же как Ni Tanrose 6FF (NTA) и Ni Tanrose 6FF (IDA), которые не хелатируются с ионами Ni. Принцип заключается в использовании боковых цепей гистидина, цистеина и триптофана белков, которые взаимодействуют с различными ионами переходных металлов Их можно широко использовать при разделении и очистке белков и пептидов.

IMAC Tanrose 6FF образуется путем соединения аминотриуксусной кислоты (NTA) с агарозой. Она может хелатировать четырехвалентные ионы металлов, что делает их более стабильными и выдерживающими более сильные восстановители с хорошей физической и химической стабильностью, благодаря чему имеет большую специфичность может применяться на более высоких скоростях потока.

Chelating Tanrose 6FF образуется путем связывания иминодиуксусной кислоты (IDA) с агарозой. Лиганды Chelating Tanrose 6FF могут обеспечивать 3 координационных центра для хелатирования с ионами металлов и одновременно обеспечивать три центра ионной связи с высокой аффинностью для очистки целевого белка. Среда IMAC Tanrose 6FF может обеспечить четыре координационных центра для хелатирования с ионами металлов и два центра ионных связей для очистки целевого белка, что означает, что среда Chelating Tanrose 6FF обладает более сильным сродством, чем IMAC Tanrose 6FF, при той же плотности лиганда и условиях с ионами металлов. Все образцы, которые нельзя адсорбировать в среде IMAC Tanrose 6FF, можно выбрать для связывания с Chelating Tanrose 6FF.

Технические параметры:

Информация для заказа:

Продукт	P/N	Спецификация	Продукт	P/N	Спецификация
IMAC Tanrose 6FF	AI0001	25 мл	Chelating Tanrose 6FF	AC0001	25 мл
	AI0002	100 мл		AC0002	100 мл
	AI0003	500 мл		AC0003	500 мл
	AI0004	1 л		AC0004	1 л

Benzamidine Tanrose 4FF представляет собой среду для аффинной хроматографии, образованную сочетанием p-аминобензидина с агарозным гелем Tanrose 4FF. Benzamidine Tanrose 4FF обычно используется для выделения и очистки сериновой протеазы или удаления сериновой протеазы из биологических образцов. Бензамидин является ингибитором сериновых протеаз широкого спектра действия (таких как трипсин, тромбин, урокиназа, калликреин, прокинин и др.), поэтому эта среда может очищать такие вещества.

Технические характеристики:

Применение
Колонка: PreCot 5ml Бензамидин Tanrose 4FF Образец: смесь трипсина Буфер для связывания: 50 mM PB, 50 mM NaCl pH 7,0 Элюирующий буфер: 0,1 M GIy pH 2.7 (200 мкл 1 M Трис-HCl, pH 9,0 следует заранее добавить в пробирку для сбора элюента) Скорость потока: 0,7 мл/мин

Информация для заказа:

Продукт	P/N	Спецификация
Benzamidine Tanrose 4FF	AF4060	25 мл
	AF4061	100 мл
	AF4062	500 мл
	AF4063	1 л

GST Tanrose 4FF Glutathione.

Среда GST Tanrose 4FF образуется путем связывания глутатиона с агарозой. Он специально используется для специфической очистки глутатиона S-трансферазы (GST) и фьюжн белков GST. Метка GST является широко используемой меткой в современной генной инженерии для экспрессии фьюжн белков, что способствует экспрессии растворимых форм и поддержанию активности белков. Принцип очистки заключается в слиянии и экспрессии глутатионтрансферазы с целевым белком. Белок объединенный с меткой GST очищается посредством взаимодействия глутатионтрансферазы и глутатионового лиганда.

Технические характеристики:

Применение
Колонка: PreCot 5мл GST 4FF Образец: рекомбинантная экспрессия белка-метки GST Буфер для связывания: 20 mM PB, 150 mM NaCl pH 7,4 Элюирующий буфер: 15 мМ восстановленный глутатион 50 мМ Трис pH 8,0

Информация для заказа:

Продукт	P/N	Спецификация
GST Tanrose 4FF	AF4010	25 мл
	AF4011	100 мл
	AF4012	500 мл
	AF4013	1 л

Аффинный сорбент Heparin Tanrose 6FF

Heparin Tanrose 6FF состоит из 6% сильно поперечно-сшитой агарозы, которая

использует гепарин в качестве лиганда. Гепарин является сильно сульфатированным гликозамином, способным связывать широкий диапазон биомолекул. ДНК-связывающие белки, такие как факторы инициации, факторы элонгации, рестриктазы, ДНК-лигазы, ДНК- и РНКполимеразы, ингибиторы сериновых протеаз, такие как антитромбин III и т.д.

Гепарин может связываться с антикоагулянтным фактором III, тромбином, тромбиноподобными факторами свертывания крови человека IX, XI и VIII. Кроме того, гепарин также может связываться с интерлейкином человека и фактором роста предстательной железы человека, рекомбинантным фактором роста эндотелия сосудов человека, фактором роста хрящей, основным фактором роста фибробластов, рекомбинантным кислотным фактором роста фибробластов человека, рекомбинантным фактором роста гепатоцитов, рекомбинантным мышиным кофактором гепарина II, рекомбинантным четвертым фактором тромбоцитов человека, рекомбинантным эндостатином человека, рекомбинантным фактором роста кератиноцитов человека и другими биологическими макромолекулами, которые экспрессируются E. coli, поэтому для очистки таких веществ можно использовать гепарин-агарозный гель.

Технические характеристики:

Информация для заказа:

Продукт	P/N	Спецификация
Heparin Tanrose 6FF	AF4070	25 мл
	AF4071	100 мл
	AF4072	500 мл
	AF4073	1 л

Аффинный сорбент Endotoxin rem Tanrose 4FF

Матрица сорбента Endotoxin rem Tanrose 4FF состоит 4% сильно поперечно-сшитого агарозного геля и полимиксин B в качестве лиганда. Его можно использовать для удаления эндотоксинов из биогенных белковых продуктов, таких как пептиды, антитела, полисахариды и т. д. Этот продукт обладает хорошей химической и физической стабильностью и хорошей биосовместимостью.

Информация для заказа:

Продукт	P/N	Спецификация
Endotoxin rem Tanrose 4FF	AE4010	10 мл
	AE4011	25 мл
	AE4012	100 мл
	AE4013	500 мл

Предварительно активированная аффинная среда Tanrose 4FF, активированная NHS.

NHS Tanrose 4FF — это предварительно активированный быстротекучий агарозный гель.

• Легко образует амидные связи с белками, обладает высокой химической стабильностью.;
• Гибкое связывание лиганда, значительно улучшающее специфичность очистки.;
• Выдвижная ручка с 10 атомами углерода для уменьшения стерических несоответствий на поверхности агарозы.;
• Простое управление, избегайте использования высокотоксичного сырья.

Технические параметры:

Информация для заказа:

Продукт	P/N	Спецификация
NHS Tanrose 4FF	AN0010	25 мл
	AN0011	100 мл
	AN0012	500 мл
	AN0013	1 л