Рибонуклеаза H (РНКаза H) представляет собой эндорибонуклеазу, которая специфически разлагает цепь РНК гибрида РНК-ДНК с образованием 5'-концевых фосфатных олигорибонуклеотидов и одноцепочечной ДНК._x000D_ _x000D_ Применение_x000D_ Удаление мРНК во время синтеза кДНК второй цепи. Удаление поли (А) последовательностей из мРНК в присутствии олиго (дТ). Олигодезоксирибонуклеотид-направленное расщепление РНК._x000D_ _x000D_ Источник_x000D_ очищен от E.coli, экспрессирующей ген РНКазы H E.coli на плазмиде._x000D_ _x000D_ Тестирование производительности и качества_x000D_ Рибонуклеаза, неспецифическая эндодезоксирибонуклеаза, 3´ и 5´ экзодезоксирибонуклеаза._x000D_ _x000D_ Определение единицы _x000D_ Одна единица гидролизует 1 нмоль РНК в 3H-меченный поли (А) поли (dT) превращается в растворимый в кислоте материал через 20 мин при 37 ° С._x000D_ _x000D_ Условия реакции:_x000D_ 20 мМ Трис-HCl (pH 7,5), 0,1 М KCl, 10 мМ MgCl 2 , 0,1 мМ DTT, 5% (вес / объем) сахарозы, 0,5 нмоль 3 H-меченого поли (А) поли (dT), и фермент в 50 мкл в течение 20 мин при 37 ° С.

Набор для обогащения Thermo Scientific EpiJET 5-hmC позволяет обогащать 5-hmC-содержащей ДНК по немодифицированной ДНК и 5-мC ДНК. В наборе используется модифицирующий фермент 5 hmC, который составлен для высокоспецифичной и эффективной модификации 5-hmC, присутствующей в CpG-динуклеотидах ДНК, и является недостаточным для любой активности по немодифицированным или метилированным цитозинам. Фермент добавляет короткую линкерную молекулу к 5-hmC, к которой биотин конъюгирован на следующей стадии химической модификации. Полученную модифицированную ДНК отделяют от немодифицированной ДНК с использованием магнитных гранул, покрытых стрептавидином._x000D_ _x000D_ Могут быть достигнуты более чем 50-кратное обогащение модифицированной ДНК с 5-hmC по немодифицированной и 5-мC-содержащей ДНК и по меньшей мере 20% извлечению входной ДНК 5-hmC. Для оценки производительности набора включены конкретные контрольные образцы ДНК (немодифицированная и 5-hmC ДНК).

Thermo Scientific X-Gluc (5-бром-4-хлор-3-индолил-бета-D-глюкуроновая кислота, соль циклогексиламмония) является субстратом для бета-глюкуронидазы (GUS), которая кодируется gusA, широко используемым репортерным геном. Глюкуронидаза расщепляет X-Gluc с образованием бесцветной глюкуроновой кислоты и интенсивного синего осадка хлорброминдиго._x000D_ _x000D_ Области применения_x000D_ _x000D_ Обнаружение экспрессии GUS в растительных клетках и тканях._x000D_ Обнаружение инфекций, вызванных кишечной палочкой._x000D_ Обнаружение бактериального загрязнения в пробах пищи и воды._x000D_ _x000D_ Примечание_x000D_ _x000D_ _x000D_ Рекомендуется приготовление 0,1 М маточного раствора в диметилформамиде или диметилсульфоксиде.

Данный мастер-микс облегчает объединение примыкающих 5'-фосфатных и 3'-гидроксильных концов в дуплексной ДНК посредством образования фосфодиэфирной связи. Его можно использовать для соединения фрагментов ДНК как с липкими концами, так и с тупыми концами, а также для восстановления повреждений в двухцепочечной ДНК с 3'-гидроксильным и 5'-фосфатным концами. Лигирование может быть выполнено с ДНК в воде, TE, элюирующем буфере или буферах 1X Anza._x000D_ _x000D_ Преимущества:_x000D_ • Лигирование завершается через 15 минут при комнатной температуре_x000D_ • Один мастер-микс для реакций лигирования с липким концом и тупым концом_x000D_ • Готовый формат сокращает количество этапов пипетирования._x000D_ • 4X концентрация позволяет использовать более разбавленную ДНК в реакции лигирования без концентрации