Основанная на ферменте кэпинга вируса осповакцины (VCE), система кэппинга осповакцины предоставляет необходимые компоненты для добавления кэп-структур 7-метилгуанилата (Cap 0) к 5-му концу РНК (1). У эукариот эти концевые структуры крышки участвуют в стабилизации (2), транспорте (3) и трансляции (4) мРНК. Ферментативное производство кэпированной РНК - простой способ улучшить стабильность и трансляционную способность РНК, используемой для трансляции, трансфекции и микроинъекции in vitro. Альтернативно, использование меченого GTP в реакции обеспечивает удобный способ мечения любой РНК, содержащей 5'-концевой трифосфат.
Фермент, укрывающий коровью осповакцину, состоит из двух субъединиц (D1 и D12). Субъединица D1 несет три ферментативные активности (РНК-трифосфатаза, гуанилилтрансфераза и гуанинметилтрансфераза); все необходимое для добавления полной структуры Cap 0, m7Gppp5'N к 5'-трифосфатной РНК (5,6). Транскрипты in vitro могут быть кэпированы менее чем за один час в присутствии кэпирующего фермента, реакционного буфера, GTP и донора метила, SAM. Кэппинг эффективен почти на 100%, и все кэпированные структуры добавляются в правильной ориентации, в отличие от котранскрипционного добавления некоторых аналогов кэпа (7).